ThermoPierce™ 免疫共沉淀試劑盒 分子生物試劑
ThermoPierce™ 免疫共沉淀試劑盒
Thermo Scientific Pierce 免疫共沉淀試劑盒提供共價抗體固定化以及進行適當控制的 co-IP 實驗所需的所有組分,成品中無抗體干擾。
Co-IP 是研究蛋白:蛋白相互作用的常用方法,其使用抗體對抗原(誘餌蛋白)進行免疫沉淀,對任何相互作用蛋白(獵物蛋白)進行免疫共沉淀。使用蛋白 A 或 G 的傳統 co-IP 方法可導致抗體重鏈和輕鏈的共洗脫,而這些重鏈和輕鏈可能與相關條帶共遷移,掩蓋了重要的結果。Pierce Co-IP 試劑盒通過將抗體共價偶聯至胺反應性樹脂上,解決了該問題。該試劑盒包含用于蛋白結合和回收的優化緩沖液、進行對照實驗所需的試劑以及高效離心柱和收集管,可縮短方案并盡量減少操作和混合。
免疫共沉淀試劑盒的特點:
•適用于任何純化抗體—使用任何純化抗體進行 co-IP 實驗,無論物種或 Ig 類別(雞 IgY、人 IgE、小鼠 IgG1、IgM 等)如何;不依賴蛋白 A 和蛋白 G 的親和結合
• 無抗體干擾—共價結合方法和非還原洗脫系統可以產生純 co-IP 產品,該產品不會被 IP 抗體污染
• 可重復使用的抗體微珠—共價抗體固定化允許重復使用制備的 IP 樹脂,并可能節省昂貴抗體
• 全套試劑盒—所有用于抗體固定和許多 IP 實驗的試劑,包括結合和洗滌緩沖液、洗脫緩沖液和便利的微量離心柱,使樹脂操作更加簡單和高效。
•隨附對照微珠—提供未衍生化瓊脂糖微珠,用作非特異性結合的陰性對照
• 通用—co-IP 方法與任何生理(非變性)蛋白樣品緩沖液兼容,緩沖液與特異性抗體抗原和蛋白相互作用復合物兼容。
免疫共沉淀 (Co-IP) 是一種用于發現蛋白相互作用的常用體外方法。Pierce 免疫共沉淀試劑盒經過配置,是有效進行 Co-IP 實驗的基本工具,能夠產生不含棘手的 IP 抗體的純 IP 和 co-IP 產物。通過使用可直接且永偶聯純 IP 抗體的 AminoLink Plus 樹脂替代蛋白 A/G 瓊脂糖微珠,對傳統 co-IP 技術實現這種改善。溫和(非還原、非變性)洗脫緩沖液可實現在保留瓊脂糖微珠上固定化抗體的同時解離 IP 靶標。結果是獲得一種可通過 Western 印跡(或甚至測序)進行分析的純產物,無抗體干擾。
除消除 IP 抗體污染外,構成 Pierce Co-IP 試劑盒的抗體偶聯方法還可避免傳統蛋白 A 和蛋白 G 方法產生的非特異性結合相互作用和浸出污染。盡管偶聯方法要求起始抗體包含在不含 BSA、明膠和其他貯藏蛋白穩定劑的無胺緩沖液中,但其不依賴于蛋白 A 或蛋白 G 這一事實意味著任何抗體種類或類別均可用于 IP(例如,IgM 和雞 IgY)。實際上,任何純化的蛋白都可以固定化用于結合配偶體的親和純化。
ThermoPierce™ 免疫共沉淀試劑盒