Takara反轉錄試劑RT reagent Kit (Perfect Real Time)
Takara反轉錄試劑RT reagent Kit (Perfect Real Time)
試劑盒成分:
5×PrimeScript Buffer (for Real Time)*1 | 400 μl |
PrimeScript RT Enzyme Mix I*2 | 100 μl |
Oligo dT Primer (50 μM) | 100 μl |
Random 6 mers (100 μM) | 400 μl |
RNase Free dH2O | 1 ml |
EASY Dilution (for Real Time PCR)*3 | 1 ml |
Takara反轉錄試劑RT reagent Kit (Perfect Real Time)
本制品是Real Time RT-PCR用的理想反轉錄反應試劑。使用具有較強延伸能力的PrimeScript RTase可以在較短時間內高效合成Real Time PCR用cDNA。操作簡單,適合進行高通量分析。進行2 Step Real Time RT-PCR反應時,與SYBR® Premix Ex Taq™ II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B) 、SYBR Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B) , SYBR Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420Q/A/B) 、 或Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 試劑配合使用,能進行高性能的基因表達分析。 本制品提供了SYBR Green分析法和探針分析法各自適合的反應體系,可以根據分析方法選擇體系。
Takara反轉錄試劑RT reagent Kit (Perfect Real Time)
1. 可以快速、高效合成Real Time PCR用cDNA,是進行2 Step Real Time RT-PCR反應的理想試劑。
2. 含有Oligo dT Primer和Random 6 mers兩種反轉錄引物,可根據實際情況區別使用。反轉錄反應可以使用Random 6 mers或Oligo dT Primer,也可以Oligo dT Primer和Random 6 mers同時使用。只擴增一種目的基因時,也可以使用Specific Primer作為反轉錄引物。
3. 本制品提供了SYBR Green qPCR分析法和探針qPCR分析法各自適合的反應體系,可以根據分析方法選擇體系。
注意:以下是SYBR Green qPCR分析法和探針qPCR分析法進行反轉錄實驗的區別
① 用于反轉錄實驗RT Primer Mix添加量。
② 用于反轉錄實驗total RNA的添加量。
4. Real Time RT PCR定量需要建立標準曲線,建立標準曲線的條件就是需要將總RNA和反轉錄cDNA稀釋到較低的濃度。如果用水或TE Buffer稀釋時,由于模板濃度低不穩定,因而會縮小曲線范圍,結果精度降低。本制品中附加了標準曲線制作用稀釋液EASY Dilution (for Real Time PCR),將Total RNA或cDNA稀釋至低濃度時也能夠進行準確稀釋,容易在寬廣范圍內獲得準確定量的標準曲線。